Q
切片机与烤片设备不在同一区域，切片结束是否可以干冰运输至指定区域烤片？
展开
收起
A
此处不是停止点，建议严格按照试剂盒使用说明书操作，贴片后立即烤片，以免影响实验结果。
Q
显微镜摆放位置是否有要求？
展开
收起
A
具体要求请参考《时空转录组FF V1.3透化测试操作说明书》、《时空转录组FF V1.3转录组实验操作说明书》，从组织切片至cDNA释放步骤所需仪器设备尽量在同一区域，并且需为显微镜提供暗室条件。
Q
如何确认显微镜是否满足STOmics实验需求？可以使用激光共聚焦显微镜吗？
展开
收起
A
显微镜是否满足实验需求，需参考《Stereo-seq 空间多组学技术成像指南》进行评估确认，评估过程中有任何疑问请联系技术支持咨询。不建议使用激光共聚焦显微镜，因为其拍照速度慢，激光能量强，易加快荧光信号衰减，导致成像效果不佳。
Q
cDNA扩增实验室为什么要和时空芯片实验室分开？
展开
收起
A
时空芯片实验室、显微观察室、cDNA扩增室这三个必选实验室的分布需符合时空组学实验操作流程及动线。cDNA扩增室气压为负压或处于空气流向最下方，防止PCR扩增产生的大量核酸引起气溶胶污染，扩散到其它实验室，尤其是时空芯片实验室。
Q
安装新风系统和通风橱是时空组学实验室的必需要求吗？
展开
收起
A
规范的时空组学实验室要求安装新风系统和通风橱，因为实验中需要用到甲醇，而甲醇挥发后经呼吸道、皮肤和消化道摄入会对人体产生毒性反应，长期处在此环境下，影响实验人员身体健康。
Q
新鲜组织OCT包埋过程应注意什么？
展开
收起
A
包埋过程中需注意取材尺寸 ( 以1 cm × 1 cm芯片为例，目前要求组织块尺寸不得大于 0.9 cm x 0.9 cm x 2 cm)，选择合适尺寸的包埋盒。新鲜组织离体后需在 30 min内完成包埋，操作时应在低温环境下快速进行，避免 RNA 降解。包埋前应吸干组织表面水分，避免产生冰晶，同时也要避免 OCT 中气泡的产生影响后续切片。
Q
如何避免新鲜组织制备过程中 mRNA 降解？
展开
收起
A
实验室条件下严格保证新鲜样本在离体 30 min 内进行直接包埋处理，以最大程度避免组织 RNA 降解。
Q
在不影响基因捕获的情况下，OCT包埋的组织块可以从- 80℃冰箱放入切片机复温切片反复几次？
展开
收起
A
目前针对鼠脑组织有反复取出切片 4 次，暂时未发现对基因捕获量有明显影响。
Q
冰冻切片组织有空洞是何原因？
展开
收起
A
排除组织类型自身的影响，组织撕裂或者空洞形成有可能以下几方面原因。
（1）缓慢或者不充分冰冻组织过程中形成的冰晶；
（2）是组织包埋过程中引入的气泡；
（3）是贴片过程中，采用的小刷子不合适，损伤冰冻切片。
